徐工讲解--日本Nepa Gene品牌NEPA21 Type II

一、核心定位与定位

• 全称：Super Electroporator NEPA21 Type II

• 定位：电转染仪，覆盖 In Vitro（体外）+ In Vivo（活体） 全场景

• 核心优势：四步多相脉冲 + 电压衰减 + 反向脉冲，兼顾效率与细胞活力

• 适用对象：原代细胞、干细胞、免疫细胞、神经元、胚胎、组织块、小鼠 / 大鼠活体

二、核心技术原理（四步脉冲）

1. Poring Pulse（穿孔脉冲）

• 高电压、短时长、多次脉冲、电压衰减

• 快速在细胞膜上形成可逆微孔，损伤最小

2. Reverse Poring Pulse（反向穿孔脉冲）

• 极性反转，增强贴壁细胞 / 组织穿孔效果

3. Transfer Pulse（导入脉冲）

• 低电压、长时长、多次脉冲、电压衰减

• 驱动 DNA/RNA/ 蛋白高效进入细胞

4. Reverse Transfer Pulse（反向导入脉冲）

• 极性反转，进一步提升导入效率与均匀性

三、关键技术参数

四、核心优势

1. 覆盖

• 一台仪器搞定：悬浮细胞、贴壁细胞、原代细胞、干细胞、免疫细胞、组织块、胚胎、小鼠 / 大鼠活体转染

2. 效率与活力双高

• 原代神经元：存活率～80%，转染效率～70%

• 原代 T 细胞 / CAR-T：转染效率可达 85%+，存活率 70%+

• 胚胎 / 受精卵：高效基因编辑，成活率高

3. 无需专用缓冲液

• 直接用培养基、PBS 或生理盐水，大幅降低使用成本

4. 精准可控

• 每步脉冲参数独立可调，内置阻抗监测，确保实验重复性

• 支持保存 100+ 自定义程序，一键调用

5. 活体专用设计

• 适配 Nepa Gene 活体电极（针式、钳式、表面电极），支持小鼠 / 大鼠肌肉、肝脏、肿瘤、脑部等局部转染

五、典型应用场景

• 基础科研：基因功能研究、蛋白表达、细胞信号通路、干细胞分化 / 重编程

• 细胞治疗：CAR-T/TCR-T 制备、间充质干细胞基因修饰、免疫细胞工程

• 基因编辑：CRISPR-Cas9 质粒 /mRNA/RNP 导入、胚胎基因编辑、类器官改造

• 生物医药：DNA/RNA 疫苗研发、病毒载体包装、药物递送效率评估

• 农业 / 微生物：植物原生质体、酵母、细菌、藻类基因改造